篇名:
兔化豬瘟疫苗迷入兔病毒性出血症病毒之監測The Detection of Rabbit Haemorrhagic Disease Virus Contamination in Lapinized Hog Cholera Vaccines
作者:
鄺懋勁;林淑民;曾瑤芬;林春基;林士鈺
中文摘要:
針對兔化豬瘟疫苗之兔病毒性出血症病毒迷入,開發反轉錄聚合?鏈反應快速診斷,設計2對引子RHDV-P1/RHDV-P2 與RHDV-P5/RHDV-P6,其PCR 產物分別為658bp 與261bp,以本省分離之兔病毒性出血症病毒RHDV-YL 株檢測本系統,可得特異之預期產物。以此方法檢測1998 年及1999 年共105 批國產兔化豬瘟疫苗均為陰性,顯示國產疫苗穩定。人工接種病毒於無特定病原豬,未觀察到有臨床症狀,且反轉錄聚合?鏈反應檢測皆為陰性反應,顯示兔病毒性出血症病毒應不會感染豬造成病害。以低劑量RHDV 人工感染兔子,則可造成無症狀而RHDV常存於兔体的情形。
英文摘要:
A reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) assay was developed to detect the contamination of rabbit haemorrhagic disease virus (RHDV) in lapinized hog cholera vaccine. Two primer sets, RHDV-P1/RHDV-P2 and RHDV-P5/RHDV-P6, were used for the RT-PCR producing two DNA fragments, 658 bp and 261 bp, respectively. No RHDV was detected in 105 lots of lapinized hog cholera vaccine collected from 1998 to 1999. In control studies, SPF pigs received RHDV did not develop any symptom and no RHDV activity was detected by RT-PCR, however rabbit received low titer of RHDV resulted in persistent infection.
備註:
年份:西元 2000 年
期別:第 36 期
詳細內容:
兔病毒性出血症(rabbit haemorrhagic disease,RHD)是一種由calicivirus 造成兔子急性感染之疾病[8,9],最早的報告見於1984 年中國大陸[6],台灣自1994 年由呂榮修博士發現本病後(未發表)迅速蔓延全島[12]。本病毒RHDV 是沒有封套的正向單股RNA 病毒(single plus-stranded RNA virus),對兔子有90-100%的感染率,感染後主要造成肝細胞的氣球樣變性(ballooning degeneration)與壞死,肺臟、肝臟、腎臟與脾臟等實質臟器出現散播性血管內凝血(disseminated intravascular clotting , DIC) 與纖維素血栓形成,以及異嗜球的浸潤[6,13],國產豬瘟活毒疫苗以兔化豬瘟疫苗為主,若有RHDV 感染可能影響到兔化豬瘟疫苗的品質。目前RHDV 常用之檢驗法有人工感染兔子、以電子顯微鏡觀察病毒型態檢查、血球凝集試驗、酵素連結免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)[5] 、免疫組織化學法(immunohistochemical method) [2]等方法,診斷上均有某些限制。亦沒有適合的細胞可供RHDV 分離,故開發核酸技術來診斷可增加其敏感性及快速診斷之目的[3]。反轉錄聚合?鏈反應(RT-PCR)偵測RHDV 的敏感性與特異性均佳,須時短可作為是否有病毒感染的偵測[12],本試驗在建立RT-PCR 並將此方法應用於兔化豬瘟疫苗迷入檢測以做好疫苗品質把關的目的。為了解RHDV 對豬的影響,亦進行人工接種RHDV於SPF 豬試驗。
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兔化豬瘟疫苗迷入兔病毒性出血症病毒之監測
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