篇名:
應用細胞培養法快速分離分枝桿菌Establishment of a Rapid Method in Cell Culture to Isolate Mycobacteria
作者:
林敬覆; 蘇杰夫; 吳義興; 張惟茗 ;蕭終融
中文摘要:
分別以 Lowenstein-Jensen Medium (L-J M) 斜面培養基及Marc-145 細胞培養對結核菌素( PPD)陽性反應陽性牛、羊及鹿之臟器淋巴組織進行核分枝桿菌之分離。631 頭牛,175 頭鹿及88 頭羊之病材中,分別分離出391 株牛型分枝桿菌及10 株鳥型分枝桿菌,其餘者仍繼續觀察中。次將本所分離所得之牛型分枝桿菌 (M. bovis-YL) 株分別於 L-J M 及 Marc-145 繼代至第九代,由培養於 L-J M 之菌落中釣取本菌,以 Dubos’Broth 10 倍階稀釋法稀釋至 10-10 階,將各階稀釋液分別接種於 L-J M(10μL/支) 及培養於載玻培養皿(2-well Chamber slide)內之Marc-145(10μL/孔)後,再將接種後所餘之各階稀釋液再分別以酸鹼處理各30 分鐘,再依上述步驟接種,進行試驗比較,結果發現未加酸鹼處理者,在接種於 L-J M 之10-7 (4.9 CFU/10μL) 階便能鏡檢出,但經酸鹼處理者,則需在10-6 (6.5CFU/10μL) 階才能鏡檢出。
英文摘要:
A total of 391 isolates of mycobacterium bovis (M. bovis) and 10 isolates of mycobacterium avium complex (M. avium complex) were obtained from 631 head of cattle, 175 deer and 88 goats with positive reactions by PPD (purified protein derivative) skin test. The Marc-145 cell line was used to culture mycobacteria. After 9 time passages(9-P) in Marc-145 cells, the YL strain of M. bovis was inoculated in slants for the acid-fast microorganism count. These results showed that the 9-P M. bovis-YL strain proliferated well in Marc-145 cells. This method would improve the culture procedure of mycobacteria.
備註:
年份:西元 2000 年
期別:第 36 期
詳細內容:
本病為一慢性疾病且為人畜重要共通傳染病之一種細菌性疾病,故於防制措施之制定至為重要,鑑於以往以傳統之斜面培養基(L-J M)分離分枝桿菌需時5 至14 週(2,7),今為縮短其分離時間,以提升診斷品質及時效,而自行研發改良以組織培養分離本菌(3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13),以與 L-J M 斜面培養基分離本菌之結果,加以分析比較,以供防制措施制定時之參考。同時為瞭解經多代繼代培養後,是否會引起其他生化性狀改變,亦為探討之範圍。今就本年度計畫所使用之方法、材料及結果等,分述於下。
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附件名稱:
應用細胞培養法快速分離分枝桿菌
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