篇名:
即時定量聚合鏈反應診斷技術與自動化資訊系統之引進與應用發展Introducing and application of the automated system to animal health inspection and quarantine
作者:
張仁杰;李淑慧;張國慧;蔡國榮;李敏旭;丁履紉;陳燕萍
中文摘要:
94 年度引進即時核酸偵測儀(Real-time PCR),並建立即時定量聚合?鏈反應診斷技術,初步應用於犬小病毒之核酸偵測,模板DNA用量為100 ng、10ng、1 ng、100 pg、10 pg、1 pg皆有螢光訊號,最低可測得至1 pg之核酸濃度,而核酸與循環數之標準曲線,可應用於核酸定量;另已收集美國印第安那州動物疾病診斷實驗室(Indiana animal disease diagnostic laboratory)及肯塔基州家畜疾病診斷中心(Kentucky livestock disease diagnostic center)的實驗室資訊管理系統相關資料,如檢體送檢流程、檢驗標準流程與系統操作介面等,可資往後本所規劃動物防檢疫自動化資訊系統之參考。
英文摘要:
We have set up the real-time PCR machine and the procedure of the nucleic acid detection with real-time polymerase chain reaction (PCR). The procedure was applied to detect canine parvovirus firstly. The level of nucleic acid which could be detected by the constructed assay in this study was as low as 1 pg. The standard curve about the relationship between concentration of nucleic acid and cycle numbers could be applied to quantify the nucleic acid. Information provided from Indiana Animal Disease Diagnostic Laboratory (ADDL) and Kentucky Livestock Disease Diagnostic Center (LDDC) can be applied successfully to set up an automated information system for animal inspection and quarantine in the future.
備註:
年份:西元 2006 年
期別: 第 41 期
詳細內容:
歐美等先進國家之動物疾病診斷實驗室已廣泛使用自動化檢體檢驗儀器設備於微生物學、分子生物學、血清學及病理學等領域[4-11,13,14],以即時核酸偵測儀(real-time PCR)在微生物學實驗室之應用為例,其優點具有快速、敏感及減少實驗接觸污染的風險。現今實驗室較常用之即時定量聚合?鏈反應技術(real-time polymerase chain reaction)係利用SYBR green 此類螢光物質可與DNA 結合,於核酸增幅過程中持續嵌入增幅產物,由電腦即時偵測螢光訊號強度,藉由螢光強度與增幅循環數關係,與已知濃度之標準DNA 互相比較,以檢測檢體中是否含病原之特異性DNA 並同時定其DNA 濃度,比傳統PCR法偵測核酸敏感度佳[1,2],此技術可發展為實驗室快速診斷技術。另外,隨著資訊科技日新月異,只擁有自動化儀器並無法完全滿足講求經濟、效率的實驗室診斷業務,必須藉由網路連結各自動化檢驗儀器與各診斷實驗室之間,成為一個整合型網路系統,可提供所有實驗室內的檢驗結果與各項實驗室資訊管理,如此方可達到從檢體送檢、檢驗過程至檢驗結果回送之自動化。由於目前國內尚無此類套裝資訊商品,可於購買後直接使用,也沒有相關獸醫機構使用類似的資訊系統,僅人醫各大醫院所使用的掛號及診療系統較為接近,惟獸醫針對多種動物並非只有人,而且檢體性質多樣化,甚至一隻動物剖檢採材後會產生相當多檢體,諸如此類的瑣碎問題,於設計上都是要考量的關鍵指標,因此,於本年度赴美動物疾病診斷中心研習時,亦將此計畫相關項目,列入在美重要觀察項目,藉由觀摩美國印第安那州動物疾病診斷實驗室及肯塔基州家畜疾病診斷中心實施多年的實驗室資訊管理系統,俾利規劃本所動物防檢疫自動化資訊系統。
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附件名稱:
即時定量聚合?鏈反應診斷
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